熒光分光光度計(jì)是最常見的實(shí)驗(yàn)儀器，首要用于對經(jīng)光源激起后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)或經(jīng)化學(xué)處理后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)成份剖析。在檢測食品安全、自然環(huán)境污染等重要的人類課題上，發(fā)揮積極的作用。熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器，有濾光片熒光計(jì)、濾光片-單色器熒光計(jì)等，通常均由以下四個(gè)部分組成：激起光源、用于挑選激起光波長和熒光波長的單色器、樣品池及測量熒光的檢測器。

熒光度計(jì)工作原理

一、激起光源

對激起光源首要考慮其穩(wěn)定性和強(qiáng)度，因?yàn)楣庠吹姆€(wěn)定性直接影響測量的重復(fù)性和精確度，而光源的強(qiáng)度又直接影響測定的靈敏度。熒光測量中常用的光源包含高壓汞燈或氙燈。氙燈產(chǎn)生激烈的連續(xù)輻射，其波長范圍在250~700nm；高壓汞燈發(fā)射365 nm、405 nm、436 nm、546 nm、579 nm、690nm和734 nm的線狀譜線，測量中常用365 nm、405 nm、436 nm三條譜線?，F(xiàn)在大部分熒光分光光度計(jì)都選用150W和500W的氙燈作光源；現(xiàn)代熒光儀器有選用12 V50W的新式溴鎢燈作光源，在300~700nm波段發(fā)射連續(xù)光譜。此外，20世紀(jì)70年代開端用激光作為激起光源，激光光源單色性好、光強(qiáng)度大、脈沖激光的光照時(shí)間短，能夠防止某些感光物質(zhì)的分解。

二、單色器

熒光剖析儀器有兩個(gè)單色器，激起單色器（第一單色器）和熒光單色器（第二單色器）。第一個(gè)單色器的效果是將不需要的光除掉，使需要的激起光透過而照射到樣品池，第二個(gè)濾光片將由激起光所產(chǎn)生的反射光、瑞利散射光、拉曼散射光和由溶液中雜質(zhì)所產(chǎn)生大多數(shù)的熒光濾去。濾光片熒光計(jì)選用濾光片做單色器，結(jié)構(gòu)簡單，價(jià)格便宜，用于已知組分樣品的定量剖析，不能供給激起光譜或熒光光譜。熒光分光光度計(jì)都選用光柵分光，能夠獲得單色性好的激起光，并能分出某一波長的熒光，以削減攪擾，并且能夠掃描激起光譜或熒光光譜。

三、樣品池

熒光剖析用的樣品池須用低熒光材料制成，通常用石英，四面均透光。形狀有正方形、長方形或圓形，但常用正方形樣品池，因其散射干擾較少。

四、檢測器

熒光分光光度計(jì)中的檢測器有較高的靈敏度，一般用光電倍增管（PMT）做檢測器。為了消除激起光對熒光測量的干擾，在儀器中，檢測光路與激起光路是相互垂直的。紫外分光光度計(jì)

現(xiàn)在，熒光分光光度法在各個(gè)范疇內(nèi)得到廣泛應(yīng)用：諸如有機(jī)電致發(fā)光和液晶等工業(yè)材料；水質(zhì)剖析等環(huán)境相關(guān)領(lǐng)域；熒光試劑的合成與開發(fā)等制藥領(lǐng)域；細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度測定等生物技術(shù)相關(guān)領(lǐng)域。